Đồ án tốt nghiệpNguyễn Hùng Cường - CNSHK13Cùng với pha tĩnh để rửa rải chất phân tích ra khỏi cột ,chúng ta cần cómột pha động. Như vậy nếu chúng ta nạp mẫu phân tích gồm hỗn hợp chất phântích A,B,C.. Vào cột phân tích ,kết quả các chất A,B,C.. Sẽ được tách ra khỏinhau sau khi đi qua cột .Quyết định hiệu quả của sự tách sắc ký ở đây là tổnghợp các tương tác.Chất phân tách A+B+CF1Pha độngF2F3Pha tĩnhHình 2.8: Lực tương tác giữ các pha trong HPLCTổng của 03 tương tác này sẽ quyết định chất nào được rửa rải ra khỏi cộttrước tiên khi lực lưu giữ trên cột là nhỏ nhất [ F1] .và ngược lại . Đối với mỗichất ,sự lưu giữ được qui định bởi 03 lực F1,F2,F3 .Trong đó F1 và F2 giữ vaitrò quyết định .còn F3 là yếu tố ảnh hưởng không lớn . Ở đây F1 là lực giữ chấtphân tích trên cột .F2 là lực kéo của pha động đối với chất phân tích ra khỏi cột.Như vậy với các chất khác nhau thì F1 và F2 là khác nhau ,Kết quả là cácchất khác nhau sẽ di chuyển trong cột với tốc độ khác nhau và tách ra khỏi nhaukhi ra khỏi cột . [ như hình dưới đây ]Phần minh hoạ quá trình tách các chất A và B trong cột tách sắc ký34 Đồ án tốt nghiệpNguyễn Hùng Cường - CNSHK13Pha độngAThời gianBHình 2.9: Quá trình tách chất trong cột sắc ký2.7.2. Sơ lược về hệ thống HPLCHệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao gồm có các bộ phận cơ bản như sau:Hình 2.10: Sơ đồ hệ thống HPLCTrong đó:1: Bình chứa pha động.35 Đồ án tốt nghiệpNguyễn Hùng Cường - CNSHK132: Bộ phận khử khí3, 4: Bộ phận tiêm mẫu: Bơm cao áp và tiêm mẫu.5: Cộ sắc ký [pha tĩnh]6: Đầu dò7: Hệ thống máy tính có phần mềm ghi nhận tín hiệu, xử lý dữ liệu và điều khiểnhệ thống.8: In dữ liệu.-Nguyên tắc:HPLC được thực hiện dựa trên việc bơm để đẩy một lượng chất lỏng dướiáp suất cao và hỗn hợp mẫu cần phân tích đi qua một cột được nhồi đầy một loạichất hấp phụ và từ đó dẫn tới việc tách các thành phần của mẫu. Chất hấp phụ –được nhồi trong cột, là các hạt rắn [như silica, polymers] với kích thước từ 2 –50 µm. Các thành phần trong hỗn hợp mẫu được tách ra khỏi nhau nhờ vào mứcđộ tương tác khác nhau với các hạt chất hấp phụ. Dòng chất lỏng dưới áp suấtcao thường là hỗn hợp của các dung môi [nước, acetonitrile và/hoặc methanol],được gọi là “pha động”. Thành phần và nhiệt độ dung môi đóng vai trò chínhtrong quá trình tách chất do tương tác xảy ra giữa các thành phần của mẫu vàchất hấp phụ. Về bản chất, các tương tác này là tương tác vật lý như tương tác kịnước [phân tán], tương tác lưỡng cực và tương tác ion, thông thường nhất làtổng hợp của tất cả các tương tác trên.36 Đồ án tốt nghiệpNguyễn Hùng Cường - CNSHK13-Các bộ phận của hệ thống HPLC+Bình chứa pha động:Máy HPLC thường có 4 đường dung môi vào đầu bơm cao áp cho phépchúng ta sử dụng 4 bình chứa dung môi cùng một lần để rửa giải theo tỉ lệ mongmuốn và tổng tỉ lệ của 4 đường là 100%.Tuy nhiên, theo kinh nghiệm, ít khi sử dụng 4 đường dung môi cùng mộtlúc mà thường sử dụng 2 hoặc 3 đường để cho hệ pha động luôn được pha trộnđồng nhất hơn, hệ pha động đơn giản hơn giúp ổn định quá trình rửa giải.Lưu ý: Tất cả dung môi dùng cho HPLC đều phải là dung môi tinh khiết sửdùng cho HPLC. Tất cả các hóa chất dùng để chuẩn bị mẫu và pha hệ đệm đềuphải là hóa chất tích khiết dùng cho phân tích.Việc sử dụng hóa chất tinh khiết nhằm tránh hỏng cột sắc ký hay nhiễuđường nền, tạo nên các peak tạp trong quá trình phân tích.+Bộ khử khí Degases.Mục đích sử dụng bộ khử khí nhằm lọai trừ các bọt nhỏ còn sót lại trongdung môi pha động, tránh xảy ra một số hiện tượng có thể có như sau:Tỷ lệ pha động của các đường dung môi không đúng làm cho thời gian lưucủa peak thay đổi.Trong trường hợp bọt quá nhiều, bộ khử khí không thể lọai trừ hết được thìbơm cao áp có thể không hút được dung môi, khi đó ảnh hưởng đến áp suất vàhoạt động của cả hệ thống HPLC.Trong các trường hợp trên đều dẫn đến sai kết quả phân tích.37 Đồ án tốt nghiệp+Nguyễn Hùng Cường - CNSHK13Bơm cao áp.Mục đích để bơm pha động vào cột thực hiện quá trình chia tách sắc ký.Bơm phải tạt được áp suất cao khỏang 250-600bar và tạo dòng liên tục. Lưulượng bơm từ 0.1 đến 10ml/phút.+Bộ phận tiêm mẫu.Để đưa mẫu vào cột phân tích theo với thể tích bơm có thể thay đồi.Có 2 cách đưa mẫu vào cột: bằng tiêm mẫu thủ công và tiêm mẫu tự động[autosamper].+Cột sắc ký.Cột chứa pha tĩnh được coi là trái tim của của hệ thống sắc ký lỏng hiệunăng cao.Cột pha tĩnh thông thường làm bằng thép không rỉ, chiều dài cột thay đổi từ5-25cm đường kính trong 1-10mm, hạt nhồi cỡ 0.3-5µm,…Chất nhồi cột phụ thuộc vào lọai cột và kiểu sắc ký.+Đầu dò.Là bộ phận phát hiện các chất khi chúng ra khỏi cột và cho các tín hiệu ghitrên sắc ký đồ để có thể định tính và định lượng. Tùy theo tính chất của các chấtphân tích mà người ta lựa chọn lọai đầu dò phù hợp.Tín hiệu đầu dò thu được có thể là: độ hấp thụ quang, cường độ phát xạ,cường độ điện thế, độ dẫn điện, độ dẫn nhiệt, chiết suất,…Trên cơ sở đó, người ta sản xuất các lọai đầu dò sau:Đầu dò quang phổ tử ngọai 190-360nm để phát hiện UVĐầu dò quang phổ tử ngoại khả kiến [UV-VIS] [190-900nm] để phát hiệncác chất hấp thụ quang. Đây là lọai đầu dò thông dụng nhất.38 Đồ án tốt nghiệpNguyễn Hùng Cường - CNSHK13Đầu dò hùynh quang [RF] để phát hiện các chất hữu cơ chứa huỳnh quangtự nhiên và các dẫn suất có huỳnh quang.Đầu dò DAD [Detector Diod Array] có khả năng quét chồng phổ để địnhtính các chất theo độ hấp thụ cực đại của các chất.Đầu dò khúc xạ [chiết suất vi sai] thường dùng đó các loại đường.Đầu dò điện hóa: đo dòng, cực phổ, độ dẫn.Đầu dò đo độ dẫn nhiệt, hiệu ứng nhiệt,…+Bộ phận ghi nhận tín hiệu.Bộ phận này ghi tín hệiu do đầu dò phát hiện.Đối với các hệ thống HPLC hiện đại, phần này được phần mềm trong hệthống ghi nhận, lưu các thông số, sắc ký đồ, các thông số liên quan đến peaknhư tính đối xứng, hệ số phân giải,… đồng thời tính tóan, xử lý các thông số liênquan đến kết quả phân tich.+In dữ liệu.Sau khi phân tích xong, dữ liệu sẽ được in ra qua máy in kết nối với máytính có cài phần mềm điều khiển.39 Đồ án tốt nghiệpNguyễn Hùng Cường - CNSHK13PHẦN 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU3.1. ĐỐI TƯỢNGĐối tượng nghiên cứu được sử dụng trong các thí nghiệm bao gồm 16 mẫuthuộc họ Berberidaceae trong đó 3 mẫu thuộc chi Berberis, 11 mẫu thuộc chiMahonia và 2 mẫu thuộc chi Podophyllum do Trường Đại học Dược Hà Nộicung cấp.3.2. ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN NGHIÊN CỨU-Địa điểm thu mẫu: Lài Cai và Hà Giang, Lâm Đồng-Địa điểm nghiên cứu:+Đại học Hải Phòng.+Viện Di truyền nông nghiệp Việt Nam.+Trường đại học Dược Hà Nội.-Thời gian tháng 1 năm 2015 đến tháng 4 năm 20163.3. THIẾT BỊ, DỤNG CỤ VÀ HÓA CHẤT+Cối sứ và chày giã+Eppendorf 0,2 ml; 0,5 ml; 1,5 ml+Cân phân tích 4 số+Tủ hút và tủ cấy vô trùng+Pipet các loại+Đầu tuýp các loại+Máy ly tâm lạnh+Máy PCR40 Đồ án tốt nghiệp+Máy điện di+Geldoc+Lò Viba+Máy định ôn+Tủ lạnh các loại-Hóa chất:Nguyễn Hùng Cường - CNSHK13Một số hóa chất thông dụng dùng trong sinh học phân tử của các hãngSigma, Merck,...CTAB, Tris base, Boric acid, NaCl, dNTPs, EDTA, 6X orangeloading dye solution, Taq Polymeraza, Ethanol, 2-propanol, Acetic acid glacial,Phenol, Chloroform, isoamyalcohol, Agarose, các mồi RAPD [bảng 3.2].3.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU3.4.1. Điều tra và thu thậpTiến hành điều tra 16 giống loài Hoàng liên gai đươc c trồng taị Lào Cai,Lâm Đồng và một số nơi khác . Thu thâp c thông tin về các giống/lòa Hoàng liêngai tại Lào Cai, Lâm Đồng và một số nơi khác.-Các nội dung điều tra gồm:+Tên của loài hoàng liên gai thu thâp c .+Nguồn gốc của loài hoàng liên gai thu thâp c .+Đặc điểm hình thái của các loài hoàng liên gai.-Chỉ tiêu theo dõi:+Các đặc trưng về lá: chiều dài, chiều rôṇg, số gân lá , màu sắc, dạng lá.+Các đặc trưng về giả hành: kiểu thân, chiều dài, hình dạng thân.41
NộI Dung:
| không có định nghĩa tiếng Anh. Nó có thể bị sai chính tả. |
Trong hóa học hữu cơ, phản ứng được giám sát chất lượng bởi sắc ký lớp mỏng.
In organic chemistry, reactions are qualitatively monitored with TLC.
Ngày 11 tháng 7, Cranmer, Cromwell, cùng đại hội đồng chức sắc, ký vào bản tuyên tín.
By 11 July, Cranmer, Cromwell, and the Convocation, the general assembly of the clergy, had subscribed to the Ten Articles.
Nên tôi đã đặt nó qua một sắc ký khí GC có trong văn phòng của tôi, và có khoảng 400 phân tử.
So I put it through a G. C., a Gas Chromatograph that I have in my office, and it's about 400.
Nên tôi đã đặt nó qua một sắc ký khí GC có trong văn phòng của tôi, và có khoảng 400 phân tử.
So I put it through a G.C., a Gas Chromatograph that I have in my office, and it’s about 400.
Phân lập β-carotene từ những carotenoid phong phú có trong trái cây thường được thực hiện bằng phương pháp sắc ký cột.
Isolation of β-carotene from fruits abundant in carotenoids is commonly done using column chromatography.
Prelog có thể tách các enantiomer chiral của bazơ của Tröger năm 1944 bằng sắc ký trên một chất nền "quay vòng quang học" [optical rotation].
Prelog was able to separate the chiral enantiomers of Tröger's base in 1944 by chromatography on an optically active substrate.
Agarose cũng có thể được hình thành thành các hạt và được sử dụng trong một số phương pháp sắc ký để làm sạch protein.
Agarose may also be formed into beads and used in a number of chromatographic methods for protein purification.
Ông chuyên về ngành hóa sinh, ở một số khía cạnh của Vitamin E và B2,và trong các kỹ thuật dẫn tới việc thành lập sắc ký.
He specialised in biochemistry, in some aspects of vitamins E and B2, and in techniques that laid the foundation for several new types of chromatography.
Chlorophyll A và B hiện rõ ở giữa bản sắc ký trong bước cuối cùng và lutein là hợp chất đầu tiên nhuộm màu vàng lên bản sắc ký.
Chlorophyll A and B are halfway in the final step and lutein the first compound staining yellow.
Nếu muốn có một thứ tự ngược lại trên bản sắc ký, một pha tĩnh không phân cực sẽ được sử dụng, như là C18-chức năng hóa silica.
If a reversed order of running of the compounds is desired, an apolar stationary phase should be used, such as C18-functionalized silica.
Phương pháp sắc ký khí / khối phổ theo dõi ion được chọn [SIM-GC / MS] là phiên bản rất nhạy của sắc ký khí và cho phép phát hiện các trường hợp SLOS nhẹ.
Selected ion monitoring gas chromatography/mass-spectrometry [SIM-GC/MS] is a very sensitive version of gas chromatography, and permits detection of even mild cases of SLOS.
Richard Laurence Millington Synge [được trao Giải Nobel hóa học năm 1952], là một nhà hóa sinh học người Anh, đồng nhận giải Nobel hóa học cho phát minh sắc ký phân bố cùng với Archer Martin.
Richard Laurence Millington Synge [awarded the Nobel Prize in Chemistry in 1952], was a British biochemist, and shared the Nobel Prize in Chemistry for the invention of partition chromatography with Archer Martin.
Nike, Adidas, New Balance và Reebok cũng thành lập các cửa hàng cho phép người dùng được lựa chọn bất cứ loại màu sắc, ký tự hoặc chất liệu nào họ thích để thiết kế cho những đôi giày của mình.
Nike, Adidas, New Balance, and Reebok also have custom shops where people can choose from the color, lettering, and materials that they want.
Chính trong thời gian làm việc ở Leeds, ông và Archer John Porter Martin đã phát triển sắc ký phân chia, một kỹ thuật được sử dụng trong việc tách phân các hỗn hợp hóa chất tương tự, đã cách mạng hóa môn hóa học phân tích.
It was during his time in Leeds that he worked with Archer Martin, developing partition chromatography, a technique used in the separation mixtures of similar chemicals, that revolutionized analytical chemistry.
Việc công tác với Archer John Porter Martin đã dẫn tới việc phát triển sắc ký phân chia, mà họ đã áp dụng thành công đáng chú ý trong các vấn đề liên quan tới thành phần và cấu trúc của các protein, đặc biệt là keratin len.
In collaboration with A.J.P. Martin this led to the development of partition chromatography, which they have applied with conspicuous success in problems related to the composition and structure of proteins, particularly wool keratin.
Ngày 23/10/1906 Tổng thống Roosevelt ký sắc lệnh 518 phê chuẩn lệnh.
On October 23, 1906, President Roosevelt issued Executive Order 518, ratifying the order.
Hệ thống như vậy thường xuyên cung cấp các dữ liệu về các thông số như pH, oxy hòa tan, độ dẫn, độ đục và màu sắc nhưng nó cũng có thể hoạt động khí sắc ký lỏng với công nghệ khối phổ [GLC / MS] để kiểm tra một loạt các chất ô nhiễm hữu cơ tiềm ẩn.
Such systems routinely provide data on parameters such as pH, dissolved oxygen, conductivity, turbidity and colour but it is also possible to operate gas liquid chromatography with mass spectrometry technologies [GLC/MS] to examine a wide range of potential organic pollutants.
Năm 1979, một sắc lệnh được ký kết thành lập ủy ban đặc biệt hướng đến bảo tồn trâu rừng Philippines.
In 1979, an executive order was signed creating a committee specifically geared towards the conservation of the tamaraw.
Sáng nay, ngài Tổng thống đã ký một sắc lệnh.
The president signed an Executive Order this morning.
Cuối cùng, trong khi các khía cạnh của các kỹ thuật phòng thí nghiệm áp dụng cho các peptide so với polypeptide và protein khác nhau [ví dụ, các chi tiết cụ thể của điện di, sắc ký, vv], ranh giới phân biệt kích thước đó peptide từ polypeptide và protein không phải là tuyệt đối: peptide dài như amyloid beta đã được gọi là protein và các protein nhỏ hơn như insulin đã được coi là peptide.
Finally, while aspects of the lab techniques applied to peptides versus polypeptides and proteins differ [e.g., the specifics of electrophoresis, chromatography, etc.], the size boundaries that distinguish peptides from polypeptides and proteins are not absolute: long peptides such as amyloid beta have been referred to as proteins, and smaller proteins like insulin have been considered peptides.
Ngày 13 Tháng Một, Bozizé đã ký sắc lệnh cách chức Thủ tướng Faustin-Archange Touadéra, như là một phần của thỏa thuận với liên minh nổi dậy.
On 13 January, Bozizé signed a decree that removed Prime Minister Faustin-Archange Touadéra from power, as part of the agreement with the rebel coalition.
+ 8 Bây giờ, xin ngài ban hành sắc lệnh và ký tên+ để điều ấy không thể thay đổi, vì luật pháp của người Mê-đi và Ba Tư không thể bãi bỏ”.
+ 8 Now, O king, may you establish the decree and sign it,+ so that it cannot be changed, according to the law of the Medes and the Persians, which cannot be annulled.”
Ngày 16 tháng 1 năm 2013, một tháng sau vụ xả súng ở Trường Tiểu học Sandy Hook, Obama ký 23 sắc lệnh hành pháp và phác thảo nhiều dự án liên quan đến việc kiểm soát súng.
On January 16, 2013, one month after the Sandy Hook Elementary School shooting, Obama signed 23 executive orders and outlined a series of sweeping proposals regarding gun control.
Thay vào đó, Tổng thống Mỹ Gerald Ford năm 1977 ký sắc lệnh 11905 tuyên bố “Người làm việc cho chính phủ Mỹ không được tham gia hoặc âm mưu ám sát chính trị”. ^ Pape, Matthew S. [2002].
Instead, President Gerald Ford signed in 1976 an Executive Order 11905, which stated that "No employee of the United States government shall engage in, or conspire in, political assassination."
Một sắc lệnh đăng ký đối tác trong nước đã được sửa đổi được thông qua bởi Hội đồng giám sát San Francisco và sắc lệnh này được các cử tri phê chuẩn là Dự luật K vào ngày 6 tháng 11.
A modified domestic partnership registry ordinance is passed by the San Francisco Board of Supervisors, and the ordinance is ratified by voters as Proposition K on 6 November.